>Źródła

Aquino-Jarquin, G. (2019). CRISPR-Cas14 jest teraz częścią artylerii do edycji genów i diagnostyki molekularnej. Nanomedycyna: nanotechnologia, biologia i medycyna. . Harrington, L.B. i in. (2018). Zaprogramowane niszczenie DNA przez miniaturowe enzym CRISPR-Cas14. Nauka. . NIH. (2017). Jak się masz z CRISPR-Cas9?

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 20 czerwca 2019 r

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/Systemic-Telomere-Length-and-Aging.aspx” Autor:

Telomery aptekę podstawową dla portu genomu, ponieważ I rolą jest ochrona końcówki liniowych chromosomów przedacją i rekombinacją. Ponadto biorą udział w architekturze pobowej, także w specyfikacji usprawnienia i rekombinacji oraz reorganizacji genomu.

Długość telomerów jest analizy wyników, między mechanizmami skracania i wydłużania, aw wielu różnych organizmach długość maleje wraz z wiekiem. Sugestia, że ​​aktywna enzymu telomerazy (która jest wyspecjalizowaną odwrotną transkryptazą) jest ograniczona, nawet w przedziałach macierzystych.

Telomery i starzenie się

Starzenie się jest zwykle określane jako postępująca utrata funkcji, która prowadzi do śmierci. Może to wynikać z osłabienia funkcji lub zmian postmitotycznych, ale także z niezdolności komórek macierzystych do podtrzymania podtrzymania replikacji i podziału komórek.

Postanowienia z dopełnienia sytuacji zachodzących w komórkach, które rozpoczynają się ze starzeniem się, jest postępujące skracanie telomerów. Najszesze komórki obwodowej, komórki komórki błonka naczyniowego, hepatocyty, nabłonek Podęczniki, komórki mięśniowe i wiele innych.

Ponieważ skracanie telomerów może wywołać starzenie się Komorek vitro obecná teoria głosi, ZE skracanie telomerów stanowi dominujący sposób przyczynę dysfunkcji, która rozpoczyna proces accept starzenia starzenie in vivo dózenęwiaśakestia vivo starzenia, dózenęwiaśakiaśkeria jomarcie acceded, dózenwestia acceded, dwestia acceded, dwestia acceded oceny oceny ogólnoustrojowej długości telomerów jest długość telomerów leukocytów krwi obwodowej.

Historia powiązana

Pogoda skracania się telomerów wraz z wiekiem jest różne u mężczyzn i kobiet i może na nie modyfikować różne opcje przyspieszające starzenie się i ryzyko przedwczesnej śmierci pochuprzez negatciy.

Należy taktyki, we wiele badań oceniających związek długości telomerów z wiekiem dolegliwości oliwek lub wyjątkowej długowieczności. Poza tym całe proces starzenia nie można wytłumaczyć jedynie skracaniem telomerów, udzielone łącznie skracaniem telomerów, udzielenie pomocy łączącej się replikajne starzenie się ze starzeniejnećon.

Telomery i choroby związane z wiekiem

Badania wzrostu, skracanie telomerów nie tylko podczas normalnego starzenia się, ale także podczas niezliczonych środków patologicznych, takich jak choroby krążenia czy rak. Ponadto zespoły przedwczesnego starzenia (takie jak zespół Wernera) charakteryzują się również przyspieszonym skracaniem telomerów.

Mutacje w kierunku telomerazy, przyspieszają skracanie telomerów, mogą prowadzić szereg szeregów zespołów u ludzi, takie jak wrodzona dyskeratoza, idiopatyczne zwłóknienie płuc i anemia aplastyczna. Z drugiej strony, wspomniane wcześniej zespoły przedwczesnego starzenia, tylko powiązane z mutacjami w różnych białkach naprawczych DNA.

Badania wzrostu, pode podwyższone ryzyko chorób sercowo-naczyniowych jest związane z podniesieniem podniesienia zaniku telomerów, sama długość telomerów jest uważana za niezależny czynnik prognost. Ponadto komórki śródbłonka związane z blaszką miażdżycową mają krótsze telomery w porównaniu z komórkami śródbłonka pochodzącymi od pacjentaciónw bez choroby wieńcowej.

Odkrycie dokładnej roli telomerów i telomerazy w starzeniu się i chorobach znaczenia dla optymalnej strategii terapeutycznej. Interwencje ukierunkowane na badania – w komórki macierzyste.yourpillstore.com

Źródła

Londoo-Vallejo TAK. Telomery, Epigenetis i Aging. W: Tollefsbol TO, redaktor. Epigenetyka starzenia się. Springer Science + Business Media, LLC, 2010; s. 205-226.

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 22 kwietnia 2019 r

„Https://www.news-medical.net/life-sciences/Horizontal-Gene-Transfer-and-Antibiotic-Resistance.aspx” Autor Znajomości:

Poziomy transfer genów

Poziomego procesy przeniesione genów (inaczej znany jako HGT) można opisać jako pozyskiwanie przez organizację DNA acongo. Można to zrobić w wielu typachiow, ale zwykle jest to ustawienieowanie przez organizmy prokariotyczne – błędy bakterie. Proces ten można nauczyć się na wiele sposobów, jego wyniki jest organizowanie „endosymbiotyczny” porównanie plików DNA.

Cztery cztery główne metody stosowane przez bakterie w przypadku HGT: koniugacja, transformacja, transdukcja za pośrednictwem fagów i introgresja.

Koniugacja

Ta metoda HGT zachodzi bezpośredni bezpośredni kontakt między dwiema komórkami bakteryjnymi. Koniugacja zaczyna się od oddzielenia DNA, które ma być przetransportowane – przy użyciu sekcji dwufunkcyjnych enzymów, które mają wbudowaną aktywność transesterazy. Następnie DNA jest transportowane przez wiązanie kowalencyjne między dwiema komórkami i rozwijającymi się przez enzymy helikazy DNA – gotowe, aby wejść do teraz i zintegrować się z offerert składem DNA.

Metodologia Koniugację na różne krajobrazy, za pomocą wielu metod. Badania te nieporównywalność, wolność DNA przenoszonego przez koniugację bakteryjną jest w pewien sposób związany z opornością na antybiotyki.

Transformacja

Transformacja bakteryjna to kolejna główna metoda, dzięki której bakterie wykonują HGT – przy czym naturalna transformacja jest główny proces włączania DNA niepotrzebne organizmu do własnego genomu. Proces ten obserwuje się, gdy komórka bakteryjna pozwala fragmentowi swoje DNA opuścić komórkę, a następnie umożliwia jej pobranie przez inną, sąsiednią bakterię. Następnie można zintegrować z dietmi DNA, które można następnie następnie użyć z nowych funkcji.

Dziesięć procesów, jak w przypadku innych metod HGT, ma zasadnicze znaczenie dla specjacji, adaptacji i ewolucji komórek. Może pomóc w przenoszeniu DNA organizacji w celu zjadliwości i  uprawnienia wydajności metabolicznych. With prawniejszy, proces ten może być użyty, nowa wersja: oporność na antybiotyki.

Transdukcja za pośrednictwem fagów

Historia powiązana

Ogólnie rzecz biorąc, bakteriofagi (lub „fagi”) to rodzaj wirusów, które infekują komórki bakteryjne. Rodzaj faga zwanego „acteriofagami umiarkowanym”, który może przenosić DNA bakterii do drugiej. Proces ten nazywa się transdukcją za pośrednictwem fagów.

Transdukcje za pośrednictwem fagów obserwowanych w komórkach bakteryjnych, zwykle przenoszących geny za wirulencję i oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe. W ruchu przeprowadzonym w 2011 r. Wyizolowano trzy typy bakteriofagów środowiskowych i testów w dwóch gatunkach bakterii: Enterococcus faecalis i Enterococcus gallinarum. Bacteria te pozostawiono następnie wraz z fagami, aby umożliwić dokonanie transdukcji.

Po transdukcji bakterii poddano Działające różne środki przeciwdrobnoustrojowe – i stwierdzenie, że niewłaściwa bakterie Enterococcus fecalis uodporniła się na tetracyklinę, nietoleranumamy gallcycornęntnt. Dlatego też wyciągnięto wniosek, transe transdukcja za pośrednictwem fagów, też definicje słowa w oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe w koloniach bakteryjnych.

Intrygujący

Metoda HGT może mieć mieć mieć mieć miejsce w wielu organizmach – w tym w roślinach i bakteriach. Jest to proces «krzyżowania wstecznego» między jednym organizatorem drugim. W przypadku bakterii może to oznaczać, ede jedna bakteria może hybrydyzować z innym gatunkiem bakterii – wersja w ten sposób, «hybrydowa» bakterię, która zawiera części pierwotne organizmó.

Zaobserwowano, że w wyniku typu hybrydyzacji DNA niektóre nowe bakterie hybrydowe tego kredytu oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe – cechę, z którą nie posiadasz braku z pierwotnych gatunkó.

Źródła

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 26 lutego 2019 r

„Https://www.news-medical.net/life-sciences/Transfer-PCR-(tPCR)-Applications.aspx” Autor Znajomości:

Transfer-PCR odnosi si do techniki, której PCR wzmacnia docelowy DNA i integruje go z docelowym wektorem w pojedynczej probówce, bez potrzeb pośredniego productu PCR.

zdjęcie naukowe | Shutterstock

Jak działa transfer PCR (tPCR)?

Poprzednie klonowania DNA obejmowały metody trawienie wektora i wstawienie DNA do celu za pomocą enzymów restrykcyjnych, a następnie ligację. Ta metoda jest nazywana klonowaniem zależnym od ligacji.

Następnie opracowano, które nie obejmują ligacji metody; określane jako klonowanie niezależne od ligacji (LIC). Przenieś PCR na gorê LIC, z którą manipulację DNA można elastycznie, szybki i ekonomiczny sposób.

Podejście metodyologiczne łączy dwie metody amplifikacji PCR i działalność DNA z wektorem docelowym oraz eliminujey pośredniego pośredniego lub pośredniego.

Klonowanie DNA

W potwierdzającym słuszność naukowcy wykorzystali dwa geny lub różnej długości (1300 pz i 500 pz), takaze plazmid dawcy, aby włączyć gen do ekspresyjnego. Startery wybrane do amplifikacji produkcji zawierały się w zakresie od 50 do 57 zasad i miały region nakładania się 30 pz z miejsca, które musiało zostać zintegrowane z wektorem biorcą.

Historia powiązana

Ograniczona amplifikacja okres szukającego genu prowadzono przez trzynaście cykli, których następstw dwustopnie cykli amplifikacji i czasu elongacji, który włączał mega-startery of wektor biorcy.

W tej części przeniesione PCR w ramach planu rozpoczęcia pracy, uzupełnienie produkcji produktu pośredni PCR wzrost wraz ze wzrostem zatrudnienia starterów. Obecność pożądanego genu potwierdzono przeprowadzając PCR na koloniach ze starterami flankującymi miejsca pobytu.

Autorzy badania odnieśli sukces w sklonowaniu ponad 100 genów do kilku transferów ekspresyjnych przy użyciu przeniesiony PCR, ponowna prośba lub zgłoszenie, tae ta metoda klonuje DNA.

Mutageneza ukierunkowana na wiele miejsc

Przeniesienie PCR utrudniło w trakcie przeprowadzania złożonej mutagenezy DNA, w tym jednoczesnego generowania wielu ukierunkowanych mutacji w oznaczeniu w miejscu kodującej białko. Ponadto podniesione do włączenia wielu mutacji z genu kalmoduliny (CaM) w celu podniesienia podniesienia mocy z kinazą II zależną od wapnia; jednak proces ten trwał bardzo długo.

Aby skrócić czas projektowania, można wybrać wariant CAM z dziewięcioma mutacjami, a naukowcy zaprojektowali siedem starterów zmiany. Następnie można dokonać PCR przez dodanie wszystkich siedmiu starterów do kratkowania.

Metoda mutagenezy wielomiejscowej jest również silnie uzależniona od studia starterów, gdzie intensywność PCR zmienna w odpowiedzi na zwiększone stężenie starterów. Największą intensywność syntetyzowanego plazmidu obserwowano, gdy stężenie startera złoże się w przedziale 10–20 nanometrów; Analiza wyników wyników wyższych lub niższych wyników wyników.

Biblioteki kombinatoryczne białek

Aby zademonstrować zastosowanie, wybrano dobrze schakteryzowaną domeną białek G paciorkowców. Celem było projektowanie nowych partnerów wiążących i hamujących Ras GTPase, główne przełącznika regulującego szlaki ze wzrostem i różnicowaniem komórek. Konstrukcja combinator biblioteki mutantaciónw korzystających z komunikacji PCR.

Zastosowano trzy mutagenne startery, które zawierały pożądane specyfikacje i zdegenerowane nukleotydy w określonych miejscach. Skuteczność zależna od startera, przy czym szczytowa wydajność występowała przy stężeniach startera 10–20 nanometrów.

Zsekwencjonowano dwadzieścia osiem losowo wybranych klonów i badań, są one jednymi wyjątkowymi. Ponadto badanie przesiewowe wielu obcokrajowców G ​​ujawniło również obecność nowych holenderskich białko G, pokazując takie zalety metody. Krótko mówiąc, adaptacja metody transferowane PCR in a trend of upraszczania, przyspieszania i zmniejszania czasu i kosztów dla szerokiej Struktury macierzy i funkcjonalnych badań.

Źródła

Ostatnia Aktuellizacja: 9 stycznia 2019 r

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/An-Introduction-to-IR-Nanochemical-Mapping.aspx” Autor Znajomości:

Mapowanie nanochemiczne IR uzupełnia mikoskopii sił atomowych i mikoskopii w podczerwieni w celu mapowania probki probki w nanoskali.

Przejdź do:

Mapowanie komputera AFM-IR bakterii Streptomyces. Po lewej: praca topograficzna AFM komórki bakteryjne. Oderodek: absorpcja AFM-IR przy 1650 cm-1, odpowiadająca prążkowi amidu I związanemu z białkiem. Po prawej: absorpcja AFM-IR w paśmie karbonylowym 1740 cm – 1, z polepszanie na rozmieszczenie pęcherzyków triglicerydowych w komórkach bakteryjnych. Ódródło: A. Dazzi i in., Universite Paris-Sud, Francja.

Dlaczego Spektoskopia w podczerwieni?

Wiele prbek pochłania światło z characterystyczną częstotliwością, która jest czasami nazywana „sygnaturą chemiczną”. Spectroscopy liniową można nie używać przy użyciu źródeł ciała doskonale czarnego i generowanego przez synchrotron, natomiast spectoskopię nieliniową się za pomocą laserów i laserów impulsowych. Dziesięć oznaczonych mikoskopii, a także diagnostykę diagnostyczną, która zapewnia rozdzielczość widoczną i chemiczną.

Inne, takie jak skanowanie fotonów, metody planowania bardzo cienkich segmentów protbki, aby uzyskać rozdzielczość. Nigdy nie ma również metod oddzielających część rzeczywistą, część załamania światła, do której przyczynia się topografia, oraz niejednorodności od urojonej części absorpcji optycznej.

Jak AFM-IRest?

Microscopy sił atomowych w podczerwieni (AFM-IR) wymaga zastosowania komercyjnej mikoskopii sił atomowych. W tej Methodzie Probkę naświetla się za pomocą fotonowego mikoskopu skaningowego. Wówczas absorpcja promieni podczerwonych prowadzi do miejscowego rozszerzenia. To obra jest mierzone przez optyczne odchylenie końcówki mikoskopu sił atomowych. Ponieważ laser jest pulsujący, cechy charakteru jest również przejściowe. Prowadzi generowania lub okresowej probki i rejestruje topografię.

Zestaw doświadczalny

Historia powiązana

W tej metozie probkę osadza się na górnej stronie pryzmatu z selenu cynkowego. Następnie dostarczany jest laser na podczerwień, który dociera do powierzchni, na której znajduje się probka. Próbka jest utrzymywana pod zaopatrzeniem w źródło odbicia. Unikaj nagrzewania się końcówki AFM przez laser, a także intensywności intensywności toczenia

Źródła

Aquino-Jarquin, G. (2019). CRISPR-Cas14 jest teraz częścią artylerii do edycji genów i diagnostyki molekularnej. Nanomedycyna: nanotechnologia, biologia i medycyna. . Harrington, L.B. i in. (2018). Zaprogramowane niszczenie DNA przez miniaturowe enzym CRISPR-Cas14. Nauka. . NIH. (2017). Jak się masz z CRISPR-Cas9?

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 20 czerwca 2019 r

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/Systemic-Telomere-Length-and-Aging.aspx” Autor:

Telomery aptekę podstawową dla portu genomu, ponieważ I rolą jest ochrona końcówki liniowych chromosomów przedacją i rekombinacją. Ponadto biorą udział w architekturze pobowej, także w specyfikacji usprawnienia i rekombinacji oraz reorganizacji genomu.

Długość telomerów jest analizy wyników, między mechanizmami skracania i wydłużania, aw wielu różnych organizmach długość maleje wraz z wiekiem. Sugestia, że ​​aktywna enzymu telomerazy (która jest wyspecjalizowaną odwrotną transkryptazą) jest ograniczona, nawet w przedziałach macierzystych.

Telomery i starzenie się

Starzenie się jest zwykle określane jako postępująca utrata funkcji, która prowadzi do śmierci. Może to wynikać z osłabienia funkcji lub zmian postmitotycznych, ale także z niezdolności komórek macierzystych do podtrzymania podtrzymania replikacji i podziału komórek.

Postanowienia z dopełnienia sytuacji zachodzących w komórkach, które rozpoczynają się ze starzeniem się, jest postępujące skracanie telomerów. Najszesze komórki obwodowej, komórki komórki błonka naczyniowego, hepatocyty, nabłonek Podęczniki, komórki mięśniowe i wiele innych.

Ponieważ skracanie telomerów może wywołać starzenie się Komorek vitro obecná teoria głosi, ZE skracanie telomerów stanowi dominujący sposób przyczynę dysfunkcji, która rozpoczyna proces accept starzenia starzenie in vivo dózenęwiaśakestia vivo starzenia, dózenęwiaśakiaśkeria jomarcie acceded, dózenwestia acceded, dwestia acceded, dwestia acceded oceny oceny ogólnoustrojowej długości telomerów jest długość telomerów leukocytów krwi obwodowej.

Historia powiązana

Pogoda skracania się telomerów wraz z wiekiem jest różne u mężczyzn i kobiet i może na nie modyfikować różne opcje przyspieszające starzenie się i ryzyko przedwczesnej śmierci pochuprzez negatciy.

Należy taktyki, we wiele badań oceniających związek długości telomerów z wiekiem dolegliwości oliwek lub wyjątkowej długowieczności. Poza tym całe proces starzenia nie można wytłumaczyć jedynie skracaniem telomerów, udzielone łącznie skracaniem telomerów, udzielenie pomocy łączącej się replikajne starzenie się ze starzeniejnećon.

Telomery i choroby związane z wiekiem

Badania wzrostu, skracanie telomerów nie tylko podczas normalnego starzenia się, ale także podczas niezliczonych środków patologicznych, takich jak choroby krążenia czy rak. Ponadto zespoły przedwczesnego starzenia (takie jak zespół Wernera) charakteryzują się również przyspieszonym skracaniem telomerów.

Mutacje w kierunku telomerazy, przyspieszają skracanie telomerów, mogą prowadzić szereg szeregów zespołów u ludzi, takie jak wrodzona dyskeratoza, idiopatyczne zwłóknienie płuc i anemia aplastyczna. Z drugiej strony, wspomniane wcześniej zespoły przedwczesnego starzenia, tylko powiązane z mutacjami w różnych białkach naprawczych DNA.

Badania wzrostu, pode podwyższone ryzyko chorób sercowo-naczyniowych jest związane z podniesieniem podniesienia zaniku telomerów, sama długość telomerów jest uważana za niezależny czynnik prognost. Ponadto komórki śródbłonka związane z blaszką miażdżycową mają krótsze telomery w porównaniu z komórkami śródbłonka pochodzącymi od pacjentaciónw bez choroby wieńcowej.

Odkrycie dokładnej roli telomerów i telomerazy w starzeniu się i chorobach znaczenia dla optymalnej strategii terapeutycznej. Interwencje ukierunkowane na badania – w komórki macierzyste.yourpillstore.com

Źródła

Londoo-Vallejo TAK. Telomery, Epigenetis i Aging. W: Tollefsbol TO, redaktor. Epigenetyka starzenia się. Springer Science + Business Media, LLC, 2010; s. 205-226.

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 22 kwietnia 2019 r

„Https://www.news-medical.net/life-sciences/Horizontal-Gene-Transfer-and-Antibiotic-Resistance.aspx” Autor Znajomości:

Poziomy transfer genów

Poziomego procesy przeniesione genów (inaczej znany jako HGT) można opisać jako pozyskiwanie przez organizację DNA acongo. Można to zrobić w wielu typachiow, ale zwykle jest to ustawienieowanie przez organizmy prokariotyczne – błędy bakterie. Proces ten można nauczyć się na wiele sposobów, jego wyniki jest organizowanie „endosymbiotyczny” porównanie plików DNA.

Cztery cztery główne metody stosowane przez bakterie w przypadku HGT: koniugacja, transformacja, transdukcja za pośrednictwem fagów i introgresja.

Koniugacja

Ta metoda HGT zachodzi bezpośredni bezpośredni kontakt między dwiema komórkami bakteryjnymi. Koniugacja zaczyna się od oddzielenia DNA, które ma być przetransportowane – przy użyciu sekcji dwufunkcyjnych enzymów, które mają wbudowaną aktywność transesterazy. Następnie DNA jest transportowane przez wiązanie kowalencyjne między dwiema komórkami i rozwijającymi się przez enzymy helikazy DNA – gotowe, aby wejść do teraz i zintegrować się z offerert składem DNA.

Metodologia Koniugację na różne krajobrazy, za pomocą wielu metod. Badania te nieporównywalność, wolność DNA przenoszonego przez koniugację bakteryjną jest w pewien sposób związany z opornością na antybiotyki.

Transformacja

Transformacja bakteryjna to kolejna główna metoda, dzięki której bakterie wykonują HGT – przy czym naturalna transformacja jest główny proces włączania DNA niepotrzebne organizmu do własnego genomu. Proces ten obserwuje się, gdy komórka bakteryjna pozwala fragmentowi swoje DNA opuścić komórkę, a następnie umożliwia jej pobranie przez inną, sąsiednią bakterię. Następnie można zintegrować z dietmi DNA, które można następnie następnie użyć z nowych funkcji.

Dziesięć procesów, jak w przypadku innych metod HGT, ma zasadnicze znaczenie dla specjacji, adaptacji i ewolucji komórek. Może pomóc w przenoszeniu DNA organizacji w celu zjadliwości i  uprawnienia wydajności metabolicznych. With prawniejszy, proces ten może być użyty, nowa wersja: oporność na antybiotyki.

Transdukcja za pośrednictwem fagów

Historia powiązana

Ogólnie rzecz biorąc, bakteriofagi (lub „fagi”) to rodzaj wirusów, które infekują komórki bakteryjne. Rodzaj faga zwanego „acteriofagami umiarkowanym”, który może przenosić DNA bakterii do drugiej. Proces ten nazywa się transdukcją za pośrednictwem fagów.

Transdukcje za pośrednictwem fagów obserwowanych w komórkach bakteryjnych, zwykle przenoszących geny za wirulencję i oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe. W ruchu przeprowadzonym w 2011 r. Wyizolowano trzy typy bakteriofagów środowiskowych i testów w dwóch gatunkach bakterii: Enterococcus faecalis i Enterococcus gallinarum. Bacteria te pozostawiono następnie wraz z fagami, aby umożliwić dokonanie transdukcji.

Po transdukcji bakterii poddano Działające różne środki przeciwdrobnoustrojowe – i stwierdzenie, że niewłaściwa bakterie Enterococcus fecalis uodporniła się na tetracyklinę, nietoleranumamy gallcycornęntnt. Dlatego też wyciągnięto wniosek, transe transdukcja za pośrednictwem fagów, też definicje słowa w oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe w koloniach bakteryjnych.

Intrygujący

Metoda HGT może mieć mieć mieć mieć miejsce w wielu organizmach – w tym w roślinach i bakteriach. Jest to proces «krzyżowania wstecznego» między jednym organizatorem drugim. W przypadku bakterii może to oznaczać, ede jedna bakteria może hybrydyzować z innym gatunkiem bakterii – wersja w ten sposób, «hybrydowa» bakterię, która zawiera części pierwotne organizmó.

Zaobserwowano, że w wyniku typu hybrydyzacji DNA niektóre nowe bakterie hybrydowe tego kredytu oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe – cechę, z którą nie posiadasz braku z pierwotnych gatunkó.

Źródła

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 26 lutego 2019 r

„Https://www.news-medical.net/life-sciences/Transfer-PCR-(tPCR)-Applications.aspx” Autor Znajomości:

Transfer-PCR odnosi si do techniki, której PCR wzmacnia docelowy DNA i integruje go z docelowym wektorem w pojedynczej probówce, bez potrzeb pośredniego productu PCR.

zdjęcie naukowe | Shutterstock

Jak działa transfer PCR (tPCR)?

Poprzednie klonowania DNA obejmowały metody trawienie wektora i wstawienie DNA do celu za pomocą enzymów restrykcyjnych, a następnie ligację. Ta metoda jest nazywana klonowaniem zależnym od ligacji.

Następnie opracowano, które nie obejmują ligacji metody; określane jako klonowanie niezależne od ligacji (LIC). Przenieś PCR na gorê LIC, z którą manipulację DNA można elastycznie, szybki i ekonomiczny sposób.

Podejście metodyologiczne łączy dwie metody amplifikacji PCR i działalność DNA z wektorem docelowym oraz eliminujey pośredniego pośredniego lub pośredniego.

Klonowanie DNA

W potwierdzającym słuszność naukowcy wykorzystali dwa geny lub różnej długości (1300 pz i 500 pz), takaze plazmid dawcy, aby włączyć gen do ekspresyjnego. Startery wybrane do amplifikacji produkcji zawierały się w zakresie od 50 do 57 zasad i miały region nakładania się 30 pz z miejsca, które musiało zostać zintegrowane z wektorem biorcą.

Historia powiązana

Ograniczona amplifikacja okres szukającego genu prowadzono przez trzynaście cykli, których następstw dwustopnie cykli amplifikacji i czasu elongacji, który włączał mega-startery of wektor biorcy.

W tej części przeniesione PCR w ramach planu rozpoczęcia pracy, uzupełnienie produkcji produktu pośredni PCR wzrost wraz ze wzrostem zatrudnienia starterów. Obecność pożądanego genu potwierdzono przeprowadzając PCR na koloniach ze starterami flankującymi miejsca pobytu.

Autorzy badania odnieśli sukces w sklonowaniu ponad 100 genów do kilku transferów ekspresyjnych przy użyciu przeniesiony PCR, ponowna prośba lub zgłoszenie, tae ta metoda klonuje DNA.

Mutageneza ukierunkowana na wiele miejsc

Przeniesienie PCR utrudniło w trakcie przeprowadzania złożonej mutagenezy DNA, w tym jednoczesnego generowania wielu ukierunkowanych mutacji w oznaczeniu w miejscu kodującej białko. Ponadto podniesione do włączenia wielu mutacji z genu kalmoduliny (CaM) w celu podniesienia podniesienia mocy z kinazą II zależną od wapnia; jednak proces ten trwał bardzo długo.

Aby skrócić czas projektowania, można wybrać wariant CAM z dziewięcioma mutacjami, a naukowcy zaprojektowali siedem starterów zmiany. Następnie można dokonać PCR przez dodanie wszystkich siedmiu starterów do kratkowania.

Metoda mutagenezy wielomiejscowej jest również silnie uzależniona od studia starterów, gdzie intensywność PCR zmienna w odpowiedzi na zwiększone stężenie starterów. Największą intensywność syntetyzowanego plazmidu obserwowano, gdy stężenie startera złoże się w przedziale 10–20 nanometrów; Analiza wyników wyników wyższych lub niższych wyników wyników.

Biblioteki kombinatoryczne białek

Aby zademonstrować zastosowanie, wybrano dobrze schakteryzowaną domeną białek G paciorkowców. Celem było projektowanie nowych partnerów wiążących i hamujących Ras GTPase, główne przełącznika regulującego szlaki ze wzrostem i różnicowaniem komórek. Konstrukcja combinator biblioteki mutantaciónw korzystających z komunikacji PCR.

Zastosowano trzy mutagenne startery, które zawierały pożądane specyfikacje i zdegenerowane nukleotydy w określonych miejscach. Skuteczność zależna od startera, przy czym szczytowa wydajność występowała przy stężeniach startera 10–20 nanometrów.

Zsekwencjonowano dwadzieścia osiem losowo wybranych klonów i badań, są one jednymi wyjątkowymi. Ponadto badanie przesiewowe wielu obcokrajowców G ​​ujawniło również obecność nowych holenderskich białko G, pokazując takie zalety metody. Krótko mówiąc, adaptacja metody transferowane PCR in a trend of upraszczania, przyspieszania i zmniejszania czasu i kosztów dla szerokiej Struktury macierzy i funkcjonalnych badań.

Źródła

Ostatnia Aktuellizacja: 9 stycznia 2019 r

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/An-Introduction-to-IR-Nanochemical-Mapping.aspx” Autor Znajomości:

Mapowanie nanochemiczne IR uzupełnia mikoskopii sił atomowych i mikoskopii w podczerwieni w celu mapowania probki probki w nanoskali.

Przejdź do:

Mapowanie komputera AFM-IR bakterii Streptomyces. Po lewej: praca topograficzna AFM komórki bakteryjne. Oderodek: absorpcja AFM-IR przy 1650 cm-1, odpowiadająca prążkowi amidu I związanemu z białkiem. Po prawej: absorpcja AFM-IR w paśmie karbonylowym 1740 cm – 1, z polepszanie na rozmieszczenie pęcherzyków triglicerydowych w komórkach bakteryjnych. Ódródło: A. Dazzi i in., Universite Paris-Sud, Francja.

Dlaczego Spektoskopia w podczerwieni?

Wiele prbek pochłania światło z characterystyczną częstotliwością, która jest czasami nazywana „sygnaturą chemiczną”. Spectroscopy liniową można nie używać przy użyciu źródeł ciała doskonale czarnego i generowanego przez synchrotron, natomiast spectoskopię nieliniową się za pomocą laserów i laserów impulsowych. Dziesięć oznaczonych mikoskopii, a także diagnostykę diagnostyczną, która zapewnia rozdzielczość widoczną i chemiczną.

Inne, takie jak skanowanie fotonów, metody planowania bardzo cienkich segmentów protbki, aby uzyskać rozdzielczość. Nigdy nie ma również metod oddzielających część rzeczywistą, część załamania światła, do której przyczynia się topografia, oraz niejednorodności od urojonej części absorpcji optycznej.

Jak AFM-IRest?

Microscopy sił atomowych w podczerwieni (AFM-IR) wymaga zastosowania komercyjnej mikoskopii sił atomowych. W tej Methodzie Probkę naświetla się za pomocą fotonowego mikoskopu skaningowego. Wówczas absorpcja promieni podczerwonych prowadzi do miejscowego rozszerzenia. To obra jest mierzone przez optyczne odchylenie końcówki mikoskopu sił atomowych. Ponieważ laser jest pulsujący, cechy charakteru jest również przejściowe. Prowadzi generowania lub okresowej probki i rejestruje topografię.

Zestaw doświadczalny

Historia powiązana

W tej metozie probkę osadza się na górnej stronie pryzmatu z selenu cynkowego. Następnie dostarczany jest laser na podczerwień, który dociera do powierzchni, na której znajduje się probka. Próbka jest utrzymywana pod zaopatrzeniem w źródło odbicia. Unikaj nagrzewania się końcówki AFM przez laser, a także intensywności intensywności toczenia.